14/04/2022, por Christine Barakat - Pesquisadores "editaram" os genes em um embrião equino, levantando a possibilidade de produzir cavalos com DNA customizado. Pesquisadores argentinos editaram com sucesso os genes em um embrião equino, aumentando a possibilidade de produzir cavalos com DNA personalizado. “Até onde sabemos”, eles escreveram no jornal anunciando seu trabalho, “embriões de cavalos editados não haviam sido relatados até agora”.
Trabalhando na Kheiron Biotech S.A e na FLENI, uma organização de pesquisa em neurociência sem fins lucrativos, os pesquisadores utilizaram uma técnica chamada repetições palindrômicas curtas agrupadas regularmente interespaçadas (CRISPR) para fazer alterações genéticas em células que foram usadas para gerar embriões clonados editados.
A tecnologia CRISPR é baseada na capacidade natural das bactérias de usar o ácido ribonucleico (RNA) para reconhecer e excluir sequências específicas de DNA em vírus que as atacam. Essa exclusão direcionada destrói o vírus, protegendo as bactérias da infecção.
Dois cientistas – Emmanuelle Charpentier, PhD e Jennifer A. Doudna, PhD – provaram em 2012 que essas “tesouras genéticas” podem ser aproveitadas e reprogramadas para editar moléculas de DNA em qualquer organismo em qualquer local predeterminado. Os dois receberam o Prêmio Nobel de Química de 2020 por essa descoberta, e o CRISPR tem sido usado em várias disciplinas científicas para produzir uma variedade de avanços, incluindo o desenvolvimento de culturas resistentes a mofo e medicamentos contra o câncer.
Os pesquisadores na Argentina usaram o CRISPR para “nocautear” o gene da miostatina. “Escolhemos o gene da miostatina por causa de seu papel na regulação do desenvolvimento muscular”, diz Gabriel Vichera, PhD, da Kheiron Biotech. “Nos cavalos de esporte, esse gene desempenha um papel crucial, pois controla a composição e o crescimento muscular.” Mais especificamente, quando esse gene é “regulado negativamente” – o que pode acontecer como uma mutação natural em alguns indivíduos – esse cavalo terá mais massa muscular, diferentes proporções de fibras musculares e será capaz de percorrer distâncias curtas mais rapidamente.
“Direcionamos o sistema CRISPR para o gene da miostatina para gerar uma edição na sequência de DNA que consistia na perda ou ganho de alguns nucleotídeos que alteravam a molécula de forma que ela não pudesse mais ser traduzida para a proteína miostatina corretamente”, diz Lucia Moro, PhD. Isso efetivamente nocauteou o gene.
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A mudança foi iniciada em três linhas de células de fibroblastos fetais, que foram então usadas como doadoras de núcleo para gerar embriões por clonagem. Esses embriões foram cultivados in vitro até o estágio de blastocisto que foram analisados para a edição, confirmando que eram knock-out para o gene da miostatina. Os embriões não foram implantados em éguas para se desenvolverem em potros, mas Vichera diz que seria esperado que eles tivessem mais massa muscular, como é visto em certas raças de gado e cães, bem como em cavalos individuais, onde essa mutação ocorre naturalmente.
Moro diz que o risco de nocautear o gene “errado” com o CRISPR é muito baixo. “Existem muitos programas computacionais para projetar sequências específicas de gRNA direcionadas ao gene de interesse e esses programas podem determinar se existe o risco de que o gRNA escolhido possa alterar outro gene. Em nosso trabalho, sequenciamos dois alvos fora do alvo de alta classificação para saber se eles estavam mutados e não estavam mutados em nossas células.”
As potenciais aplicações do CRISPR em cavalos vão além do gene da miostatina, diz Vichera. “Escolhemos eliminar o gene da miostatina como prova de conceito. Mas nosso objetivo de longo prazo é identificar sequências de alelos naturais vantajosas presentes no genoma de alguns indivíduos e incorporá-los em outros para dotá-los das características desejadas.”
O CRISPR também pode ser usado para remover ou editar genes causadores de doenças, diz Moro. “Com esta técnica disponível, outras revisões podem ser alcançadas, incluindo a correção de defeitos genéticos que causam doenças equinas.”
Fonte: https://equusmagazine.com/